實時熒光定量PCR(Ouantitative Real-time CR)是在聚合酶鏈反應(PCR)中加入熒光染料或英光探針,利用熒光信號累實時檢測整個PCR反應進程的儀器。廣泛應用在分子診斷,分子生物學研究，動植物檢疫以及食品安全檢測等領域。

其原理是激光或LED等光源發(fā)出的光經過特殊設計的激發(fā)干涉濾光片后,經過反應杯并激發(fā)其中的熒光基團,熒光基團發(fā)出的熒光通過經匹配設計的發(fā)射干涉濾光片后被光電探測器接收。

每個反應循環(huán)收集一次數(shù)據，通過實時擴增曲線,準確地確定CT值,從而根據建立的標準曲線利用CT值確定DNA起始拷貝數(shù)做到了真正意義上的DNA定量。PCR巧妙地把核算擴增與雜交,光譜分析和實時檢測技術結合在一起,利用熒光信號來檢測PCR產物。

濾光片在實時熒光定量PCR中起到重要作用，它們用于選擇性地透過特定波長的熒光信號，以確保只有與所用熒光染料特定波長相對應的信號被檢測。

具體來說，實時PCR系統(tǒng)通常配備有多個不同波長的熒光檢測通道，每個通道都有相應的濾光片。這些濾光片的作用是只允許特定波長的熒光信號通過，而阻止其他波長的光信號進入檢測器。這樣，可以分別監(jiān)測不同熒光染料所發(fā)出的信號。

 實時熒光定量PCR檢測儀濾光片應用和特點：

多通道檢測: 實時PCR系統(tǒng)中的濾光片通常設計為多通道，能同時檢測多種目標序列或多種熒光標記，使實驗更高效。

定量測量: 通過合理選擇熒光染料和相應的濾光片，可以實現(xiàn)對PCR擴增產物的準確定量。

多用途應用: 這些濾光片可以適用于不同類型的PCR實驗，如定量PCR、定性PCR等，也可以用于多種實驗目的，如基因表達分析、變異檢測等。

提高信噪比: 通過使用合適的濾光片，可以降低背景信號，提高檢測的信噪比，從而增強PCR反應的準確性和靈敏度。

實時熒光定量PCR中的濾光片在確保準確檢測和定量PCR產物方面發(fā)揮關鍵作用，為分子生物學研究和臨床診斷提供了有力的工具。